크로마토그래피 검출기란? 컬럼에서 나온 성분을 신호로 바꾸는 장치

컬럼의 분리가 검출기를 거쳐 측정 기록이 된다 — 크로마토그래피 검출기

검출기는 컬럼에서 나온 성분의 특성에 반응해 측정 신호를 만들고, 데이터 시스템은 이 신호를 시간에 따라 기록해 크로마토그램으로 표시한다. 분리된 성분도 검출기가 충분히 반응하지 않으면 피크로 확인하기 어렵다. 검출된 신호를 성분명과 함량으로 해석하려면 시험법에 따른 확인과 검량이 필요하다.

컬럼의 분리가 검출기를 거쳐 측정 기록이 된다

크로마토그래피 검출기는 컬럼에서 나온 성분의 물리적·화학적 특성에 반응해 측정 가능한 신호를 만드는 장치다. 컬럼은 성분이 서로 다른 시간에 나오도록 분리하고, 검출기는 용출되는 성분에 반응한다. 데이터 시스템은 전달받은 신호를 시간에 따라 기록해 크로마토그램으로 표시한다. 검출기의 신호 변환 원리

개념 흐름도: 컬럼 ─성분의 이동→ 검출기 ─측정 신호→ 데이터 시스템 ─시간별 표시→ 크로마토그램.

WHO 국제약전은 크로마토그램을 시간 또는 부피에 따른 검출기 응답이나 용출액 농도 등의 표시로 정의한다. 여기서는 일반적인 분석용 GC와 HPLC에서 사용하는 시간에 따른 신호 기록을 다룬다. 국제약전의 크로마토그램 정의

검출부를 지나는 성분의 띠가 시간에 따른 피크를 만든다

컬럼에서 분리된 성분은 일정한 폭을 가진 띠로 검출부에 도달한다. 검출기가 반응하는 성분의 띠가 들어왔다가 빠져나가는 동안 신호가 변하고, 이 변화를 시간에 따라 기록하면 피크가 된다. UV/Vis 검출에서는 유로 셀 안의 대상 성분 농도 변화가 흡광도 변화로 이어진다. 유로 셀의 흡광 측정 원리

시료 성분 외에도 이동상이나 첨가제가 배경 신호와 잡음에 영향을 줄 수 있다. 따라서 신호의 작은 변화가 모두 분석 대상의 피크를 뜻하지는 않는다. 배경 신호에 영향을 주는 이동상

FID는 이온 전류를, UV/Vis는 빛의 흡수를 이용한다

GC의 불꽃이온화검출기(FID)에서는 운반기체와 함께 도달한 성분 중 반응하는 성분이 수소·공기 불꽃에서 이온을 생성한다. 생성된 이온을 전극으로 모을 때 생기는 전류를 측정 신호로 이용한다. Agilent의 FID 원리 설명

HPLC의 자외선·가시광선 검출기(UV/Vis)에서는 컬럼 용출액이 유로 셀을 통과한다. 빛을 흡수하는 성분이 셀에 들어오면 투과하는 빛의 세기가 달라진다. 광검출기는 빛의 세기를 전기 신호로 바꾸고, 이를 처리해 흡광도를 얻는다. 성분의 흡광 특성은 파장에 따라 달라지므로 검출 파장이 응답에 영향을 준다. Shimadzu의 흡광 검출 원리

비교 항목 GC의 FID HPLC의 UV/Vis
성분이 도달하는 곳 운반기체가 연결되는 불꽃 액체 이동상이 흐르는 유로 셀
측정에 이용하는 현상 불꽃 속 이온화에 따른 전류 발생 선택한 파장의 빛 흡수
반응하는 성분의 범위 많은 유기화합물, 특히 탄화수소 측정 파장에서 자외선·가시광선을 흡수하는 성분
충분한 응답을 기대하기 어려운 대상 이산화탄소 등 FID가 거의 반응하지 않는 성분 측정 파장에서 흡광이 없거나 약한 성분

FID의 적용 범위는 탄소를 포함한다는 사실만으로 판단할 수 없다. 제조사 자료도 반응이 약하거나 없는 성분을 별도로 설명한다. FID의 반응 대상과 예외

FID는 이온 전류를, UV/Vis는 빛의 흡수를 이용한다 — 크로마토그래피 검출기

피크가 없을 때는 해당 조건에서 검출할 수 있는지를 확인한다

컬럼에서 성분이 분리되어 나와도 검출기가 충분히 반응하지 않으면 피크를 확인하기 어렵다. 검출 방식이 성분의 특성과 맞지 않거나, 신호가 배경 잡음과 구분되지 않는 경우가 여기에 해당한다. 따라서 피크가 없다는 관찰만으로 시료에 그 성분이 없다고 단정할 수 없다. 이는 제조사의 검출 원리와 적용 범위 설명에서 도출되는 해석이다. 검출 방식의 부적합과 배경 잡음의 영향

신입 분석자는 시험법의 검출기 명칭과 실제 기록 채널을 대조하고, UV/Vis라면 지정된 검출 파장을 확인하는 것이 좋다. 표준액에서 대상 성분의 응답이 나타나는지와 공시험에서 어떤 배경이 나타나는지도 함께 살핀다. 이는 측정 조건과 반응을 연결하기 위한 실무 권고다. 표준액에서 피크를 확인했더라도 더 적은 양이 포함된 시료까지 검출할 수 있다고 자동으로 보장되지는 않는다. 파장에 따른 반응, 검출기 감도와 잡음의 정의

피크가 없을 때는 해당 조건에서 검출할 수 있는지를 확인한다 — 크로마토그래피 검출기

측정 신호를 성분명과 함량으로 해석하려면 확인과 검량이 필요하다

FID의 전류나 UV/Vis의 흡광도만으로 성분명이 자동으로 확정되지는 않는다. 서로 다른 성분이 겹쳐 용출되면 같은 피크에 응답이 함께 기록될 수도 있다. 따라서 시험법에서 정한 표준물질과의 비교 등 확인 절차가 필요하다. PDA처럼 흡수 스펙트럼을 얻는 검출기는 추가 비교 정보를 제공한다. 국제약전의 피크 정의, PDA의 스펙트럼 비교

신호를 함량으로 바꾸는 데에도 대상 성분의 양과 응답을 연결하는 검량이 필요하다. 검출기 감도는 성분에 따라 달라질 수 있으므로 서로 다른 성분의 피크 크기를 그대로 양의 비율로 읽을 수 없다. 국제약전도 검출기 응답을 설명하고, 정량에서는 표준물질의 응답과 비교하는 절차를 제시한다. 검출기 응답과 정량

측정 신호를 성분명과 함량으로 해석하려면 확인과 검량이 필요하다 — 크로마토그래피 검출기

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근거 자료

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